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Clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeat(CRISPR)/Cas9是细菌和古细菌一种不断进化适应的免疫防御机制。CRI成足尽叶概理存字SPR/Cas9利用一段小RNA来识别并进行有效的靶向DNA剪切。主要分为两个组成部分Cas9核酸酶和gRNA湖剧比载吧两部分。原理是：Cas9结合gRNA，通过gRNA上的靶点序列，在目标基因组上找到靶点序列，并揭开双螺旋，Cas9将剪切DNA双链，造成DNA双链断裂。Cas9使用简单，比较方便多个靶点同360问答时操作。但是也比较容易脱靶，
现在CRISPR/Cas9靶向基因操作的应用
1. 细胞系的应用：共转染cas9质粒与gRNA质粒到细胞中，48小时后做突变率的检测，和后续的单克隆培养或细胞株筛选工作。
小动物的基因敲除：体测经春通精激外转录cas9和gR较啊色拉NA成RNA，然后好迅城亮取鲜显微注射到动物的受精卵中。
大动物的基因敲除：先在原代细胞株中做好基因敲除（同细胞系方法），通过克隆动物技术，将基因敲除的细胞系的细胞核移植到去核的卵细胞中。
4.关植物的基因敲除：已有成功案列。
5.微生物的基因敲除：需要表达载体和该物种具有NHEJ修复方式。
推荐公司：北京唯尚立德生物科技有限公司，本人在其做过几次，效果挺好的。
