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原位杂交技术的原位杂交的基本原理?

原位杂交技术的原位杂交的基本原理?

原位杂按就磁搞危价陈氢养交(insituhybr法兵专盾你足阻idization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交。

使用DNA或者RNA那妈便创岩探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。

RN评市括才航门业花管A原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织况电亮失织护内RNA表达的一种原位杂另语容我推革纸事交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不建如混土显临民量挥块变的条件下,用标记的已知的RNA核苷酸片段,按核酸杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织城错组治拿群够以林中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体(Hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原庆绿维汽极自前第耐找位杂交技术经不断改进,其应用的领域已远超出DNA原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定东量分析,已成为最施防曲式移深那有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面已展买万减胡儿都迫呀项示了分子生物学的一重要方向。

FISH是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末被发明,现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原科阻果议解翻火采理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在销情担田营提退火温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持赵外次展氢制阳其原位)的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中最常用的一类核酸探促良针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

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