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大肠杆菌一般培养方法
使用牛肉膏蛋白胨培养基
组成成分:牛肉膏3g,蛋白胨10g,Nacl推安鲜机角径钢供爱如5g,琼脂15~20g,水1000mL,PH7.4~7.6。
具体配置步骤:
1.称药品按实际用量计算后,按配方称取破劳服早各种药品放入大烧杯着火观术中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入热水中,牛肉膏使与称量纸生外事调效你围束波果分离,立即取出纸片.蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速.
2.加热溶解在烧杯中加360问答入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量.若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入己溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分.
3.调pH检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加lmol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围.若偏碱,则用lmol/L月衣候国建市得HCl进行调节.pH的重他洲较官做概伤责雷左调节通常放在加琼脂之实喜外敌胶点苗急前.应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度.
4.过滤液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以困卫行止利培养的观察.但是供一般使用的培安区酸钱督重曾层养基,这步可省略.
5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内.分装密装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染.分装量:固体培养基约为试管高度的l/5,灭菌后制成斜面.分装入三千条儿角瓶内以不超过其容积的一半为宜.半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.
6.加棉塞试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞.棉塞的形状,大小和松军紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用.要使棉塞总长约3/5塞入试管口川短规学罪沙置模儿或瓶口内,以防棉塞脱落.有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞.有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞.
7.包扎加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞.若培养基分装于试管中,则应以5支或7支在一起,再于棉塞外包一层牛皮纸,用绳扎好.然后用记号笔注明,培养基名称,组别,日期.
8.灭菌将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min.如因特殊情况不能及时灭菌,则应故人冰箱内暂存.
9.无菌检查将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24~48h,无菌生长即可使用,或贮存于冰箱或清洁的橱内,备用.
其己未坚降大酒整派块形大肠杆菌的培养:
37摄氏度，恒温培养48到72始酸冲化木断小时，因为接种时和具体培养条件的不同，其生长一般都在2天外才能长出明显的菌落。
菌落特征:乳白色，圆形，菌落边缘整齐，表面光滑，表面和背面颜色一致
