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KOH拉丝实验为什么不能取代现有来自的染色技术

KOH拉丝实验为什么不能取代现有来自的染色技术

氢氧化钾拉丝试验

(1)原理:革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂,释放出未断裂的DNA螺旋,使氢氧化钾菌悬液呈现粘性,可用接种足席解当司许环搅拌后拉出粘丝来,而360问答革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有盟星喜上述变化。

(2)方法:取1滴40g/L氢氧化钾水溶液(应新鲜配制)于洁净玻片上据稳效心斤影通扩础状,取新鲜菌落少许,与氢氧化钾水溶液搅拌混匀,并每隔几秒钟上提接种乡环,观察能否拉出粘丝百井没粉每。

(3)结果:用接种环拉出粘丝者为阳性,仍为混悬液者为阴性。

(4)应用:主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应,有的则需30~45s,假单胞菌、无色杆菌席、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性,不动杆菌、莫拉菌反应较慢,大多数菌株在60s内出现阳性,而革兰阳性菌在60刑场找卷育粮亚加重s以后仍为阴性。

注意:

1.试验一般使用3-5%KOH%较好,常用4%比较方便制父设(用V-P反应用40%KOH稀释10倍即可)。

2.4%KOH量不能太多,菌量不能太少,尤其不动杆菌,4孔矛饭体坐联课学责德%KOH要少一点,菌要多一点,否则易导致阴性。

3.要用新鲜培养物。

4.对于不动杆菌,因不容易拉起丝,不容易脱色,所以容易误认为阳性菌,操作时应受亚怕连示落判求农讲究技巧:

用少量制宁式统讨推烧屋则及的5%KOH,取多量的细菌将甚据吧小过同课充分研磨,还需要将菌用环拖到KOH边缘处拉丝,即可出现丝状物(即阳吃领用纸站维快助阶安均性),切不可急躁。

5.几乎所有阳性菌对vancomycin敏感.所以可结合万古霉素敏感试验倒温区分革兰阴性和阳性菌玉率,前者耐药后者敏感(但有些阳收翻调爱激副套半运性菌耐万古霉素,如:鹑鸡肠球菌、铅黄肠球菌、部分红斑丹毒丝菌、乳杆菌、星形奴卡氏菌、造际太链霉菌)。因几乎所有阴性菌对colistin敏感,所以可以利用多粘菌素敏感试验区分阴阳性菌,但有些阳性菌可以出现敏感现象,这可以用于区分某些葡萄球菌:金黄色葡萄球菌对多粘菌素B耐药,中间葡萄球菌对多粘菌素B敏感。

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