三、GUS染色步骤
1)取材:将根茎、叶片、花瓣等组织剪成小片,放到1.5ml离心管;
【注意】:染色用植物材料的制备方法根据特定组织和器官类型而有差异。对于拟南芥的根/花/叶片,以及烟草幼苗的根,可以不做任何预处来自理直接进行染色;但是,对于烟草和马铃薯的茎和叶片需要先剪切成薄片(~1-3mm)再进行染色。输席息需师而,更大的组织样品,需用银率两只攻真空渗透法来促进染色工作液渗补医统该怎基剧刘入细胞。
2)染色:加入适量体积现配好的染色工作液,以完全覆盖材许盟缺料为准。铝箔纸包好360问答,室温孵育3h-过夜。同固胜态白参工村蒸县殖述时设置阴性和阳性对占降感照细现照实验;
3)脱色:将染色好的材料转入70%酒精中脱色2坏村还雨啊占部-3次,直至阴性对照施脚远胡承端办材料变为白色。GUS染色坐阳性的蓝色斑点非常稳定,不会被酒精脱色。
4)观察:大部分GUS染色阳性的蓝色斑点肉眼能观察到,然而,有些材料可能蓝色斑点很细微,需要显微镜下才能观察到。【注意】:白色背景上的蓝色斑点即为G与US表达位点。