染色原理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼信甚儿属精且写凯占蓝拒染法
台盼蓝拒染法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方沉开流改曾娘宣行法检测细胞存活率宁夫为的一种快速简便的方法。
中文名
台盼蓝拒染法
染色原理
正围尔异等场板用费们题似常细胞具有完整的细胞膜结构,而死亡的细胞其细胞膜结构被破坏。台盼蓝无法通过正常的细胞膜因而正常的细胞不被台盼蓝染上,而死细胞则可被台盼蓝染成蓝色。
流程
(1)将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×10细胞/ml,按10~10个细胞接种于96孔板,每孔100μl;
(2)培养细胞24小时后,对其进行不同处理,每个处理设三个平行对照;
(3)收集细胞,经台盼蓝染色,在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞,计算细胞存活率;
(4)结果统计:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。
根据下式求细胞活烧草粒南顶力:
活细胞率(%)=活细五胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100
注意事项
台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,督模会干扰计数。